一、RT-PCR用什么方法做统计？

描述统计法。统计描述是统计分析的最基本内容，是指应用统计指标、统计表、统计图等方法，对资料的数量特征及其分布规律进行测定和描述

二、RT-PCR原理及操作

原理：RT-PCR 为反转录RCR（reverse transcription PCR）和实时PCR（real time PCR）共同的缩写。逆转录PCR，或者称反转录PCR(reverse transcription-PCR, RT-PCR)，是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。在RT-PCR中，一条RNA链被逆转录成为互补DNA，再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。

步骤：

（一）预变性：

破坏DNA中可能存在的较难破坏的二级结构。使DNA充分变性，减少DNA 复杂结构对扩增的影响，以利于引物更好的和模板结合，特别是对于基因组来源的DNA模板，最好不要吝啬这个步骤。此外，在一些使用热启动Taq酶的反应中，还可激活Taq酶，从而使PCR反应得以顺利进行。

（二）变性--退火--延伸循环：

①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；  ②模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；  ③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链。

（三）PCR仪扩增循环后72度延伸10分钟

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详细资料请参考：on   

三、请问提完RNA后，RT-PCR的具体步骤是什么

在总RNA含量中rRNA占最多，约80%。完整的总RNA样品应呈现出三条条带，分别为28S rRNA、18S rRNA、5S rRNA。其中28S rRNA条带的亮度应约为18S rRNA条带亮度的2倍，这表明RNA样品比较完整，基本无降解。如果两条带的亮度反过来，则说明RNA样品已发生降解。如果在点样槽内或槽附近有荧光区带，则表明RNA样品中有DNA污染。

纯度分析：纯净的RNA样品其OD260/OD280的比值应介于1.7~2.0，小于此比值说明有蛋白或苯酚污染，如果比值大于2.0则可能被异硫氰酸胍污染；OD260/OD230比值应大于2.0，如果小于此比值说明有小分子及盐类污染。用RNA反转录和做RACE对RNA要求既要纯度高，且浓度约1微克左右。

四、Real-time PCR和RT PCR有什么区别

RT-PCR现在一般指反转录PCR，有时候也被说成Real-time-PCR就是实时定量PCR； Real-time-PCR就是实时荧光定量PCR，现在标准的说法是qPCR，就是定量PCR。

五、提取细菌蛋白可以用rt-pcr吗

RT-PCR是用于将提取到的RNA逆转录成cDNA后进行PCR扩增的过程。

提取细菌蛋白你直接买一盒现成的细菌蛋白提取试剂盒就行了，一个样品大约20元，一盒几十次提取的试剂盒只要几百块就够了